测序建库是分子生物学中用于高通量测序技术的一个关键步骤，其目的是将待测的DNA或RNA样本进行处理，转化为适合测序的文库。以下是建库的基本原理和流程：
DNA建库
DNA提取：首先从细胞或组织中提取DNA。
DNA片段化：使用物理或化学方法将DNA随机切割成特定大小的片段。
接头连接：在DNA片段两端加上特定的接头序列，这些接头用于后续的PCR扩增和测序反应。
PCR扩增：通过PCR技术扩增带有接头的DNA片段，增加检测的可靠性和数量。
纯化与定量：去除杂质并定量文库，准备上机测序。
RNA建库
RNA提取：从细胞或组织中提取RNA。
反转录：由于RNA的不稳定性，需要将其反转录成cDNA。
cDNA片段化：将cDNA随机切割成特定大小的片段。
接头连接：在cDNA片段两端加上接头序列。
PCR扩增：通过PCR技术扩增带有接头的cDNA片段。
纯化与定量：去除杂质并定量文库，准备上机测序。
建库的质量直接影响测序结果的质量和可靠性。不同的建库方法适用于不同的测序需求，如全基因组测序、转录组测序等。