梯度洗脱是一种色谱技术，用于提高复杂样品的分离效果。在梯度洗脱中，流动相的组成（通常是两种或多种溶剂的比例）会在分析过程中按照一定的程序逐步改变，这允许不同极性的组分在不同的时间点被洗脱出来，从而实现良好的分离。
定义 ：梯度洗脱是在同一个分析周期内，流动相的浓度配比按一定程序不断改变的方法。应用：
梯度洗脱特别适用于反相液相色谱和离子交换色谱。
原理：
通过逐步增加流动相中强溶剂的比例，可以提高分析物的洗脱强度，使得难以分离的组分能够有效分离。
优点
缩短分析周期；
提高分离能力；
改善峰型，减少拖尾现象；
增加检测灵敏度。
类型
低压梯度（外梯度）：
在常压下预先混合溶剂，然后用高压泵输入色谱柱。
高压梯度（内梯度系统）：使用两台高压泵，分别将两种不同极性的溶剂送入梯度混合室混合后，再输至柱系统。
梯度洗脱通过调整流动相的极性、pH值或离子强度，模拟气相色谱中的程序升温效果，使得样品中的各组分能在各自最适宜的条件下被洗脱，达到良好的分离效果