WB内参,即 Western Blotting实验内部参照,是指在蛋白质印迹法(免疫印迹试验)中,用来作为标准参照的蛋白质。这些参照蛋白质通常由管家基因编码,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,不受样本处理或其他因素的影响。通过检测内参蛋白的表达量,可以校正上样量的差异,评估实验体系的正常性,以及更准确地比较不同样本或处理组之间目的蛋白的表达差异。
在Western Blot实验中,常用的内参蛋白包括:
GAPDH(糖酵解磷酸化酶)
β-actin(β-肌动蛋白)
β-tubulin(β-微管蛋白)
Lamin B1(核纤层蛋白B1)
Histone H3(组蛋白H3)
选择合适的内参蛋白可以提高实验的准确性和可重复性。在分析Western Blot结果时,通常会对目标蛋白和内参蛋白的条带强度进行灰度值分析,并将目标蛋白的强度除以内参蛋白的强度,从而进行归一化处理,使不同样品间的目标蛋白表达变化具有可比性。