高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC）是一种 高效、快速的分析分离技术，是现代分离测试的重要手段。它以液体作为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。其分离机制与常规柱色谱相同，但填料更加精细，需高压泵推动，柱效高，分析速度快。
HPLC法具有以下特点：
高柱效：
由于固定相颗粒度小，传质速度快，柱效远高于传统液相色谱。
高灵敏度：
采用高压泵和检测器，能够检测极微量的物质。
高分辨率：
能够有效分离结构相似的物质，提供高纯度的分离结果。
高选择性：
通过选择不同的固定相和流动相，可以实现对特定化合物的选择性分离。
广泛适用性：
无论是极性还是非极性，小分子还是大分子，热稳定还是不稳定的化合物，均可用HPLC进行测定。
HPLC法在多个领域有广泛应用，包括化学、生物、制药、环境等，特别是在需要高纯度、高灵敏度和快速分析的情况下，HPLC法已成为一种不可或缺的技术。
HPLC的类型与应用
液-固吸附层析：
固定相为具有吸附活性的吸附剂，如硅胶、氧化铝等。流动相为极性较低的溶剂，洗脱剂则根据试样性质选用针对性溶剂。本法适用于分离异构体、抗氧化剂与维生素等。
液-液分配层析：
固定相为单体固定液构成，分为极性键合相层析和非极性键合相层析。极性键合相层析适用于极性化合物的分离，非极性键合相层析适用于非极性化合物的分离。离子对层析利用离子对原理进行分离，适用于电离性化合物的分离。
离子交换层析：
固定相为离子性键合相，流动相主要是水溶液，pH值最好在被分离酸、碱的pK值附近。本法适用于离子化合物的分离。
HPLC的基本设备
高效液相层析仪通常包括输液系统、层析柱与检测系统三部分。输液系统使用高压泵输入流动相，检测器用于检测分离后的化合物，并通过记录仪、积分仪或数据处理系统记录色信号或进行数据处理。
综上所述，高效液相色谱法（HPLC）是一种强大的分析工具，具有高柱效、高灵敏度、高分辨率和高选择性等优点，广泛应用于化学、生物、制药、环境等多个领域。