凝胶层析，也称为凝胶过滤层析或尺寸排阻层析，是一种基于分子尺寸和形状差异进行分离的技术。其原理可以总结如下：
固定相：
凝胶层析的固定相是化学惰性的多孔物质，通常是凝胶颗粒，具有立体网状结构，形成许多孔穴。
分子大小：
样品中的分子根据其大小有不同的扩散行为。大分子由于其体积大，不能渗透到凝胶的孔穴中，只能沿颗粒间的空隙随流动相流动，因此较早流出柱外。小分子可以完全渗透进入凝胶颗粒内部，并在其中扩散，因此最后流出柱外。中等大小的分子部分渗透进入孔穴，其流出时间介于大分子和小分子之间。
分离效果：
由于不同大小的分子在凝胶中的流动行为不同，样品中的各个组分就会按照分子大小从大到小的顺序依次流出，实现分离。
应用：
凝胶层析常用于蛋白质、核酸和其他大分子的分离纯化，因为它对分子大小和形状具有高度的选择性。
希望这能帮助你理解凝胶层析的原理