台盼蓝染液是一种 细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性以及细胞是否存活。具体应用如下:
检测细胞膜完整性:
活细胞的胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使其无法进入细胞内,因此活细胞不会被染成蓝色。而死细胞或细胞膜不完整的细胞,其通透性增加,台盼蓝能够进入细胞内,将其染成淡蓝色。
区分活细胞和死细胞:
通过台盼蓝染色,可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。活细胞不着色,保持正常形态且有光泽;而死细胞则着浅蓝色并膨大,无光泽。
巨噬细胞活体染色:
台盼蓝还可以被巨噬细胞吞噬,因此也用作巨噬细胞的活体染色剂。
细胞存活率检测:
在细胞培养中,通过台盼蓝染色可以方便地检测细胞的存活率。将细胞悬液与台盼蓝溶液混合,染色后通过显微镜观察,可以计数活细胞和死细胞的数量,从而计算出细胞活率。
实验步骤
1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液。
2. 用0.5%胰蛋白酶和0.2%EDTA的混合液消化培养的贴壁细胞,制成细胞悬液。
3. 将待染色细胞稀释至所需浓度。
4. 每0.1ml细胞悬液中加入新鲜配制的染液一小滴,室温下染3—5分钟。
5. 染色过的细胞材料置于玻片上,加盖玻片后放高倍镜下观察。
6. 死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽;活细胞不着色并保持正常形态,有光泽。
7. 计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目,并统计未染色细胞,计算细胞活率。
建议
台盼蓝染液是一种简单且有效的细胞活性检测方法,适用于多种细胞类型的存活率检测。在实验过程中,确保染液的浓度和染色时间控制得当,以提高结果的准确性和可靠性。