层析（Chromatography）是一种利用物质在固定相与流动相之间不同的分配系数差异来分离混合物的技术。它是一种多级分离技术，通过流动相（液体或气体）流经固定相（通常是多孔的固体或覆盖在固体上的液体），使得混合物中的各个组分因沿固定相移动速度的差异而分离。
层析技术广泛应用于化学、生物学和医学领域，用于分离和测定有机化合物、金属离子、氨基酸等。根据固定相和流动相的不同性质，层析可以分为多种类型，如吸附层析、分配层析、离子交换层析和亲和层析等。
层析的特点包括高效、灵敏，能够将性质极为相似的物质彼此分离，并且可以用于微量样品的分析和大量样品的纯化制备。