吸光度通常使用分光光度计进行测量。分光光度计能够测量溶液对特定波长光的吸收程度。根据比尔-朗伯特定律，吸光度（A）与溶液的浓度（C）、光程长度（b）以及摩尔吸收系数（k）成正比，数学表达式为：
```
A = kbc
```
其中：
`A` 表示吸光度；
`k` 是摩尔吸收系数，单位通常是 `L/（mol*cm）`；
`b` 是溶液的厚度，单位通常是 `cm`；
`c` 是溶液的浓度，单位通常是 `mol/L`。
分光光度计有数显和指针读数两种类型，读数范围不同，但都能用于测定吸光度。在使用前，需要确保仪器的指针位于0刻度线上或通过调节螺丝将指针调至0刻度线上，以保证测量结果的准确性。
此外，吸光度法也可用于定量分析，通过测量已知浓度的标准溶液的吸光度，绘制标准曲线，然后利用该曲线对未知浓度的样品进行定量分析。