反向液相色谱（Reverse Phase Liquid Chromatography, RPLC）是一种基于溶质在 极性流动相和非极性固定相之间的分配差异，通过精确检测并收集相应的馏分来实现物质分离纯化的技术。其工作原理是，流动相的极性小于固定相的极性，使得极性较大的溶质分子更容易被非极性固定相吸附，而极性较小的溶质分子则更容易流向流动相，从而实现分离。
在反向液相色谱中，固定相通常由非极性材料（如含C18链的硅胶）构成，而流动相则通常为极性溶剂（如甲醇、乙腈等）。这种色谱技术的优点包括高柱效、强分离能力和清晰的保留机理，使其成为液相色谱分离模式中使用最为广泛的一种。
反向液相色谱适用于分离非极性、极性或离子型化合物，广泛应用于化学、生物化学、制药等领域。例如，在蛋白质和酶的分离分析中，反相液相色谱受到了越来越多的关注。
总之，反向液相色谱是一种高效的分离和纯化技术，通过精确控制流动相和固定相的极性，可以实现对各类化合物的有效分离。