稳转是什么

啥都懂点 · 2025-01-03 11:59:44

稳转(Stable Transfection)是一种细胞转染策略,指的是将外源基因整合到宿主细胞的基因组中,使细胞能够长期稳定地表达这些基因。与瞬转(Transient Transfection)不同,稳转中的外源基因不会随着细胞的分裂和增殖而丢失,因此可以实现基因的持续表达。

基因整合:

稳转涉及将目的基因序列或抑制目的基因的shRNA序列装载至重组载体中,并通过各种方法(如慢病毒系统或转座子系统)将这些序列整合到宿主细胞的染色体中。

长期表达:

稳转细胞株允许细胞长期稳定地表达外源基因,即使在细胞分裂后也能保持基因的存在。这使得研究人员能够进行长期的观察和实验,例如观察蛋白间相互作用以及基因对细胞功能的影响。

应用:

稳转细胞株广泛应用于基因功能研究、小鼠疾病模型建立、小分子药物和抗体药开发等场景。它们在蛋白抗体生产、信号传导、药物靶点研究以及免疫治疗药物开发等方面具有重要作用。

构建方法:

构建稳转细胞系的方法主要有两种:质粒构建稳转细胞系和慢病毒构建稳转细胞系。慢病毒感染方法因其高滴度包装技术和广泛的细胞感染能力,成为目前主流的稳定细胞系筛选方法。

总结来说,稳转是一种通过将外源基因整合到宿主细胞基因组中,实现长期稳定表达的技术,广泛应用于科研和药物开发等领域。

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