反相色谱（Reverse Phase Chromatography，RPC）是一种液相色谱技术，它使用 非极性固定相和极性流动相来进行样品的分离和分析。在反相色谱中，固定相通常是由硅胶或其他非极性材料组成，而流动相则通常包含水、甲醇或其他极性溶剂。由于流动相的极性大于固定相，所以称为反相色谱。
反相色谱主要用于分离 脂溶性化合物，例如高级脂肪酸、油脂、游离甾体等，这些物质在非极性固定相上的吸附性较弱，而在极性流动相中的溶解度较高，因此更容易被洗脱出来。此外，反相色谱也适用于分离非极性和极性较弱的化合物，如蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾体、脂类、脂肪酸、碳水化合物、生物碱等含有非极性基团的物质。
反相色谱的特点包括：
高分离效率：
由于其基于溶质与固定相之间的疏水性相互作用，反相色谱能够高效地分离各种化合物。
广泛的应用：
反相色谱在现代液相色谱分析中应用最为广泛，占整个HPLC应用的70%以上。
适用性广：
可以用于从简单的小分子到复杂的生物大分子的分离和纯化。
操作简便：
反相色谱的操作条件相对宽松，流动相的组成和比例可以灵活调整，以适应不同性质化合物的分离需求。
总的来说，反相色谱是一种极为重要的液相色谱技术，适用于多种类型化合物的分离和分析，特别是在生物大分子和复杂样品的分离方面具有显著优势。