细胞传代的时间主要取决于细胞的类型及其生长状态:
贴壁型细胞
当细胞汇合度达到100%时,需要进行传代操作。
对于以克隆形式生长的细胞,当它们达到或接近最大密度,即观察不到细胞明显扩增时,就需要进行传代。
接触抑制型细胞需要在细胞长满之前传代,以避免接触抑制后产生性状的改变。
悬浮型细胞
必须在细胞达到最大饱和密度之前传代,悬浮细胞传代时只需稀释至合适的密度,让细胞有充足的营养恢复到对数生长期。
悬浮培养的细胞在进入对数生长期且未达到汇合状态时也应进行传代,达到汇合状态时,悬浮培养的细胞会聚集成团块,转动培养瓶时培养基会变得浑浊。
干细胞
干细胞在培养过程中,每当细胞数量翻倍时,就需要将细胞从培养瓶中传代到新的培养瓶中,以维持其生长环境。
其他注意事项
有些细胞在达到汇合前就需要传代,如接触抑制型细胞如3T3-Swissalbino。
细胞传代间隔是两次传代相隔的时间,不同细胞类型的传代间隔可能不同,需要根据具体细胞类型和经验来确定。
总结:
贴壁型细胞在汇合度达到100%或克隆生长达到最大密度时传代。
悬浮型细胞在未达到最大饱和密度时传代。
干细胞在细胞数量翻倍时传代。
接触抑制型细胞应在细胞长满前传代。
建议在传代前观察细胞形态,确保细胞处于适合传代的状态。