什么是内参引物

破点思维教育 · 2025-01-04 07:04:11

内参引物是在实时荧光定量PCR(qPCR)中使用的,与目标模板一起扩增的一个已知基因序列。内参引物的上游引物通常用荧光标记,而下游引物不标记。在PCR反应过程中,内参和目标模板同时被扩增,生成不同长度的扩增产物。由于内参和目标模板的长度不同,它们可以通过电泳或高效液相色谱等方法分离,并分别测定其荧光强度。通过比较内参和目标模板的荧光强度,可以定量待检测模板的起始量。

使用内参引物的主要目的是 校正样品处理过程中可能存在的效率差异,使得不同样品的起始量可以均一化,从而更准确地定量目标模板的浓度。内参通常选用的是实验室已有的固定序列,或者通过基因工程方法合成。

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