ELISA(酶联免疫吸附测定)的目的主要是 通过检测样品中特定抗原或抗体的浓度来确定是否存在某种病原体或疾病。这是一种常用的体外诊断方法,基于免疫反应原理,利用已知的抗原或抗体与待测样本中的相应成分(如病毒、细菌等)发生特异性结合,并通过显色反应显示出来。
在医学领域,ELISA常用于检测病毒、细菌、寄生虫等病原体的抗体或抗原,例如乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)等,帮助诊断相关疾病。此外,ELISA在生物学研究、环境监测和农业等领域也有广泛应用,如检测激素、细胞因子、农药残留、重金属等。
ELISA的基本步骤包括:
1. 将目标蛋白/抗原固定在微孔板表面。
2. 从板上洗涤未结合/过量的蛋白质/抗原。
3. 添加标记抗体,该抗体随后将结合板中存在的目标抗原/蛋白质。
4. 从板上洗掉未结合(过量)的抗体。
5. 加入酶反应的底物,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,通过光度计测定吸光度,从而判断样本中抗原或抗体的存在及含量。
通过这些步骤,ELISA能够提供一种灵敏、特异的检测方法,帮助研究人员、医生和实验室技术人员诊断疾病、研究生物分子和监测环境污染。