酵母双杂交（Yeast Two-Hybrid, Y2H）是一种 检测蛋白质-蛋白质相互作用的技术。该技术的基本原理是利用酵母细胞内的两种互补DNA序列相遇，使两个融合的蛋白质互相作用，从而激活酵母细胞内的特定报告基因（reporter gene）的表达。当两个蛋白质的结合能够激活报告基因的表达时，就表明这两个蛋白质之间存在相互作用关系。
酵母双杂交系统包括以下几个关键组成部分：
转录激活因子：
如酵母转录因子GAL4，它包含两个独立的功能结构域：DNA结合结构域（DNA-BD）和转录激活结构域（AD）。
DNA结合结构域（DNA-BD）：
负责与目标蛋白质的DNA结合。
转录激活结构域（AD）：
负责激活报告基因的表达。
报告基因：
如LacZ和HIS3，用于检测蛋白质之间的相互作用。
在实验中，待研究的两种蛋白质分别克隆（融合）到酵母表达质粒的转录激活因子的DNA结合结构域和转录激活域上，构建成融合表达载体。当这两个融合蛋白在酵母细胞内表达并相互作用时，DNA-BD和AD被牵拉靠近，恢复行使功能，从而激活报告基因的表达。通过分析报告基因的表达情况，可以判断两个蛋白质之间是否存在相互作用。
酵母双杂交技术具有以下优点：
高灵敏度：
能够检测到蛋白质之间微弱的、瞬间的相互作用。
真核环境：
在真核模式生物酵母中进行，能够维持天然蛋白结构和功能。
操作性强：
实验过程相对简单，易于操作和大规模筛选。
因此，酵母双杂交技术在蛋白质相互作用研究、功能研究、基因筛选等领域具有广泛应用。