多光子显微镜（Multiphoton Laser Scanning Microscopy, MPLSM）是一种 高级的显微镜技术，它利用两个或多个光子同时被样品吸收的非线性光学过程来激发荧光，从而实现对生物样品深层结构的高分辨率成像。与传统的荧光显微镜相比，多光子显微镜具有以下不同之处：
多光子效应：
在多光子显微镜中，通常使用红外激光，其能量远低于紫外或可见激光。这意味着一个光子激发需要两个或更多的红外光子同时被吸收，从而减少了非特定样品区域的激发。
深层穿透力：
由于使用红外激光，多光子显微镜能够更深地穿透样品，实现3D成像，并且由于激光能量较低，样品受到的损伤较小，从而延长了样品的寿命。
高空间分辨率：
多光子显微镜具有亚细胞分辨率，能够对细胞和组织的结构和功能进行高空间分辨率的成像，特别适用于活体细胞和组织的长时间观察。
低光毒性：
由于多光子显微镜使用的激光能量较低，因此光漂白和光毒性较小，适合对活细胞进行长时间成像。
灵活性：
多光子显微镜可以配备不同的激光器、扫描仪、成像探测器和体内成像模块，适用于多种科研应用，如深部组织多色成像、活体三维时移测量以及自然和偏压条件下的钙监测等。
多光子显微镜在生命科学、生物医学和材料科学领域有着广泛的应用，包括活细胞成像、组织成像、神经科学研究以及药物开发等。例如，它可以用于观察大脑最深层的皮层结构，理解神经活动、认知功能以及神经疾病的机制。
综上所述，多光子显微镜是一种先进的显微镜技术，具有出色的成像深度和分辨率，特别适用于需要高分辨率和深层穿透力的活体细胞和组织成像。