反相键合相色谱（RP-HPLC，Reversed Phase High Performance Liquid Chromatography）是一种 液相色谱技术，其特点在于使用极性较弱的固定相和极性较强的流动相。在这种色谱体系中，溶质分子在流动相的推动下与固定相接触时，其非极性部分会更倾向于与固定相上的非极性烷基官能团相结合，而不是被流动相所溶解。
固定相和流动相的极性差异：
反相色谱中，固定相的极性通常小于流动相的极性。这种设计使得流动相能够有效地将非极性或弱极性溶质从固定相上洗脱下来。
应用广泛：
RP-HPLC适用于分离各种类型的化合物，包括非极性、极性或离子型化合物。由于其高选择性和广泛的应用范围，它已成为液相色谱中最主要的分离模式之一。
固定相和流动相的选择：
典型的RP-HPLC固定相是十八烷基键合硅胶（C18），而流动相则常用甲醇、乙腈等极性溶剂。非典型反相色谱系统可能会使用弱极性或中等极性的键合相和极性大于固定相的流动相组成。
优点：
RP-HPLC具有高柱效、长使用寿命和良好的重现性。它还可以进行梯度洗脱，消除了分配色谱法的缺点。
应用实例：
反相键合相色谱广泛应用于药物分析、天然产物分离、环境检测、食品安全等领域，用于分离和定量各种极性或非极性化合物。
总之，反相键合相色谱通过利用固定相和流动相之间极性的差异，实现了对各种类型化合物的有效分离，具有广泛的应用和显著的优点。