电泳缓冲液是在进行分子电泳时使用的溶液,主要作用是维持电泳系统的恒定pH值,确保电泳过程中体系的酸碱度稳定。电泳缓冲液也是电泳场中的导体,影响物质的电泳迁移率。常见的电泳缓冲液包括TAE(Tris-Acetate-EDTA)、TBE(Tris-Borate-EDTA)、TPE(Tris-Phosphate-EDTA)和MOPS(3-Morpholino-propanesulfonic acid)等。
配制方法示例(TAE缓冲液)
1. 称量Tris 242g,Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L烧杯中;
2. 向烧杯中加入约800ml去离子水,充分搅拌均匀;
3. 加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解;
4. 加去离子水定容至1L后,室温保存。
作用
维持恒定的pH值,防止电泳过程中因电解反应导致pH值变化;
作为电泳场中的导体,影响样品的电泳迁移率;
防止被分离样品与缓冲液发生化学反应,保护样品的理化性质和生物活性。
注意事项
缓冲液的成分和离子强度会影响物质的电泳迁移率;
在电泳过程中,正极发生氧化反应,负极发生还原反应,长时间电泳会导致缓冲液的pH变化,因此需要使用缓冲液来维持稳定。
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