《怪兽大学》的主要角色包括：
麦克·华斯基（Mike Wazowski）：
一只绿色的独眼怪兽，梦想成为一名惊吓专员，聪明勤奋但身材矮小。
詹姆斯·P·沙利文（James P. Sullivan）：
体型庞大、毛茸茸的怪兽，自信且魅力四溢，但过于依赖天赋，缺乏努力。
郝刻薄院长（Dean Hards）：
怪兽大学的校长，严肃威严，对学生要求严格。
史乖宝·斯奎奇（Scott 'Squishy'）：
麦克的朋友，性格有些胆小。
老唐·卡尔顿（Don Carlton）：
怪兽大学的学生之一。
阿拱蓝道·博格斯（Randall Boggs）：
怪兽大学的学生之一。
泰瑞·佩里（Terri Perry）：
怪兽大学的学生之一，泰瑞和杰瑞的双胞胎之一。
杰瑞·佩里（Terri Perry）：
怪兽大学的学生之一，泰瑞和杰瑞的双胞胎之一。
卡尔（Carl） 和 道格（Doug）：
怪兽大学的教授，分别教授惊吓理论和实践课程。
这部电影是2001年动画《怪兽电力公司》的前传，讲述了主角们从死对头变成挚友的故事